454GSFLX+System-香港时代医疗集团

454 GS FLX+ 是基于焦磷酸测序原理建立的高通量基因组测序系统，其主要应用的领域包括微生物群落多样性分析（16s, 18s, ITS）、复杂环境样品的宏基因组学研究等。

Roche 454 GS FLX+ 测序平台是罗氏旗下的454生命科学推出的最新升级版测序仪，该仪器的最大读长能够达到1000bp，测序准确性高达99.997%，达到了与Sanger相当的长度与准确性，并降低了测序成本，从而集一代sanger测序读长及质量优势与二代测序高通量特点于一身。

454 GS FLX+ 是基于焦磷酸测序(Pyrosequencing) 原理建立的高通量基因组测序系统，依靠生物发光进行DNA序列分析的技术：在多种酶的协同作用下，当碱基正确配对时，发生一个合成反应和一个化学发光反应的偶联，释放光信号。光信号实时被高灵敏度CCD捕获，最终达到测序的目的。基于454 GS FLX+ 较长读长的特点，其主要应用的领域包括：微生物群落多样性分析（16s, 18s, ITS）、复杂环境样品的宏基因组学研究、微生物基因组的de novo测序、转录组测序研究，此外还可应用于外显子测序、目标区域捕获、病原菌检测等研究。

性能参数

系统GS FLX+ System
测序试剂	GS FLX Titanium XL+	GS FLX Titanium XLR70
读长	最大读长1,000bp Mode读长700bp	最大读长600bp Mode读长450bp
Reads/run	~1,000,000 Shotgun	~1,000,000 Shotgun ~700,000 amplicon
读长参数	85%read读长＞500bp 45%read 读长＞700bp	85%read读长＞300bp 20%read读长＞500bp
典型数据量/run	700Mb	450Mb
一致性准确率	99.997%	99.995%
周期	23 h/run	10h/run
测序样品	gDNA或者cDNA	gDNA, cDNA, 或者amplicons (PCR products)
样品混合测序	MIDs( Multiplex Indetifiers )：132种分区：2, 4, 8, 16个

数据来自454官方网站。实际情况取决于不同的样品和基因组特点；一致性准确率来自大肠杆菌（E.coli）15× 覆盖度的数据。

基因大肠杆菌（E.coli）全基因组测序

测序流程

应用方向

宏基因组测序

全基因组的de novo测序

转录组测序

扩增子测序

重测序

454GSFLX+System

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